Welcher Schritt in der PCR erfordert ein thermostabiles Enzym?

Inhaltsverzeichnis:

Welcher Schritt in der PCR erfordert ein thermostabiles Enzym?
Welcher Schritt in der PCR erfordert ein thermostabiles Enzym?

Video: Welcher Schritt in der PCR erfordert ein thermostabiles Enzym?

Video: Welcher Schritt in der PCR erfordert ein thermostabiles Enzym?
Video: Die PCR-Methode 2024, März
Anonim

Taq-Polymerase Wie die DNA-Replikation in einem Organismus erfordert die PCR ein DNA-Polymerase-Enzym, das neue DNA-Stränge herstellt, wobei vorhandene Stränge als Vorlagen verwendet werden. Die typischerweise in der PCR verwendete DNA-Polymerase heißt Taq-Polymerase, nach dem hitzetoleranten Bakterium, aus dem sie isoliert wurde (Thermus aquaticus).

Warum ist eine thermostabile DNA-Polymerase für die PCR erforderlich?

aquaticus ist ein Bakterium, das in heißen Quellen und Hydrothermalquellen lebt, und die Taq-Polymerase wurde als ein Enzym identifiziert, das in der Lage ist, den proteindenaturierenden Bedingungen (hohe Temperatur) zu widerstehen, die während dessen erforderlich sind PCR.

Welcher Schritt wird in der PCR für thermostabile Enzyme verwendet?

Eine thermostabile DNA-Polymerase wird in wiederholten Zyklen von Primer-Annealing, DNA-Synthese und Dissoziation von Duplex-DNA verwendet, um als neue Matrize zu dienen. Die theoretische Amplifikation der Matrizen-DNA beträgt 2 unter der Annahme, dass die Reagenzien nicht einschränkend sind und das Enzym seine volle Aktivität beibehält. wobei n die Anzahl der Zyklen ist.

In welchen PCR-Schritten werden Enzyme verwendet?

Drei PCR-Schritte─Denaturierung, Annealing und Verlängerung─wie im ersten Zyklus gezeigt, und die exponentielle Amplifikation der Ziel-DNA mit wiederholten Zyklen.

Welches Enzym wird zur Amplifikation in der PCR verwendet?

Taq-DNA-Polymerase wird üblicherweise verwendet, um PCR-Produkte von 5 kb oder weniger zu amplifizieren. PCR-Produkte im Bereich von 5–10 kb können mit Taq-DNA-Polymerase amplifiziert werden, erfordern jedoch oft mehr Optimierung als kleinere PCR-Produkte.

Empfohlen: